Вплив мезенхімальних стромальних клітин кісткового мозку на функціонування гемопоетичних клітин за сублетального опромінення
Loading...
Date
2025
Authors
Руссу, Ірина
Білько, Надія
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Мета: дослідження впливу мезенхімальних стромальних клітин на функціонування гемопоетичних клітин мишей лінії Balb/C після дії іонізуючої радіації у сублетальній дозі в культурі клітин in vitro та in vivo. Методи. Для вивчення впливу стромального мікрооточення було використано модель співкультивування кровот" ворних клітин опромінених тварин та мезенхімальних клітин, що формують фідерні шари, у культурі in vitro. За допомогою барвника трипанового синього проведено оцінку кількості гемопоетичних клітин з ушкодженням цитоп" лазматичної мембрани та визначено рівень клітинної загибелі. Культивування клітин у культурі дифузійних камер in vivo дозволило оцінити проліферативний потенціал гемопоетичних стовбурових клітин кісткового мозку опромінених тварин. Результати. Дослідження взаємодії між стромальними та гемопоетичними клітинами кісткового мозку мишей Balb/C дозволило виявити модифікуючий вплив строми на рівень інтерфазної та репродуктивної загибелі клітин-попередників внаслідок дії іонізуючої радіації у сублетальній дозі. Зокрема, через 2 доби відсоток загиблих клітин у суспензії з безпосереднім контактом зі стромою in vitro був зниженим порівняно з гемопоетичними клітинами, де такий контакт був відсутнім: (40,5 ± 2,6) % проти (60,1 ± 2,8) %. Спостерігалося також підвищення кількості клітинних агрегатів у культурах опромінених клітин-попередників, які заздалегідь взаємодіяли з мезенхімальними стромальними клітинами in vitro (25,2 ± 1,9 КУО), у порівнянні з клітинами, які напряму не взаємодіяли зі стромою (15,3 ± 2,8 КУО). Висновки. Співкультивування зі стромальними клітинами суттєво знижувало рівень радіаційно індукованої загибелі гемопоетичних клітин кісткового мозку та підвищувало їхню колонієутворюючу активність, проте для цього був потрібен безпосередній контакт із стромою у культурі in vitro.
Description
Objective: investigation of the influence of mesenchymal stromal cells on the functioning of hematopoietic cells of Balb/C mice after the exposure to ionizing radiation at a sublethal dose in cell culture in vitro and in vivo. Methods. To study the influence of stromal microenvironment, a cocultivation model of hematopoietic cells of irradiated animals and mesenchymal cells forming feeder layers was used in the in vitro culture. Using the trypan blue dye, the number of hematopoietic cells with cytoplasmic membrane damage was assessed and the level of cell death was determined. Cell cultivation in the diffusion chambers culture in vivo allowed assessing the proliferative potential of bone marrow hematopoietic stem cells of irradiated animals. Results. Investigation of the interaction between bone marrow stromal and hematopoietic cells of Balb/C mice allowed determining the modifying influence of the stroma on the level of progenitor cells’ interphase and reproductive death due to ionizing radiation action at a sublethal dose. In particular, after 2 days the percentage of dead cells in suspension with direct contact with the stroma in vitro was reduced compared to hematopoietic cells where such contact was absent: (40.5 ± 2.6) % vs (60.1 ± 2.8) %. The increase in cell aggregates number was also observed in the cultures of irradiated progenitors, which had previously interacted with mesenchymal stromal cells in vitro (25.2 ± 1.9 CFU), compared to the cells, which did not directly interact with the stroma (15.3 ± 2.8 CFU). Conclusions. Co"cultivation with stromal cells have significantly reduced the level of radiationinduced death of bone marrow hematopoietic cells and increased their colony"forming activity, however, this required the direct contact with stroma in the in vitro culture.
Keywords
гемопоез, іонізуюча радіація, строма, кістковий мозок, миші Balb/C, стовбурові клітини, культура клітин in in vitro та in vivo, стаття, hematopoiesis, ionizing radiation, stroma, bone marrow, Balb/C mice, stem cells, cell culture in vitro and in vivo
Citation
Руссу І. З. Вплив мезенхімальних стромальних клітин кісткового мозку на функціонування гемопоетичних клітин за сублетального опромінення / І. З. Руссу, Н. М. Білько // Проблеми радіаційної медицини та радіобіології = Problems of Radiation Medicine and Radiobiology. - 2025. - Вип. 30. - С. 273-283. - https://doi.org/10.33145/2304-8336-2025-30-273-283 - Текст паралельно українською й англійською мовами.