Створення рослин пшениці з дріжджовими генами біосинтезу трегалози TPS1 i TPS2

Simple item page
dc.contributor.authorКваско, А.
dc.contributor.authorІсаєнков, С.
dc.contributor.authorДмитрук, К.
dc.contributor.authorЄмець, Алла
dc.date.accessioned2021-02-03T21:36:08Z
dc.date.available2021-02-03T21:36:08Z
dc.date.issued2020
dc.description.abstractВведено в культуру in vitro рослини кількох сортів пшениці м’якої (Triticum aestivum L.) і досліджено їх регенераційну здатність. Відібрано сорти Миронівська 67 і Мірхад з метою перенесення в геном дріжджових (Saccharomyces cerevisiae) генів біосинтезу трегалози (TPS1 і TPS2) задля підвищення їх посухостійкості. Перенесення генів здійснювали за допомогою Agrobacterium-опосередкованої трансформації, для цього було створено відповідні векторні конструкції pBract214-TPS1 і pBract214-TPS2 із застосуванням технології Gateway-клонування. Як експланти для трансформації використовували незрілі зародки пшениці. В експериментах було використано штами A. tumefaciens GV3101, які несли окремо конструкції pBract214-TPS1 і pBract214-TPS2 з цільовими генами TPS1 та TPS2 відповідно, що знаходились під контролем промотору убіхітину кукурудзи PUbi, і селективним маркерним геном гігроміцин-фосфотрансферази (hpt). Селекцію трансгенних ліній здійснювали на поживних середовищах у присутності гігроміцину. Трансгенну природу отриманих ліній підтверджували за допомогою ПЛР-методу з використанням специфічних праймерів до генів TPS1 та TPS2.uk_UA
dc.description.abstractВведены в культуру in vitro растения нескольких сортов пшеницы (Triticum aestivum L.) и исследован их регенерационный потенциал. Отобраны сорта Мироновская 67 и Мирхад с целью интеграции в их геном дрожжевых (Saccharomyces cerevisiae) генов биосинтеза трегалозы (TPS1 и TPS2) для повышения их устойчивости к засухе. Перенос генов осуществляли с помощью Agrobacterium-опосредованной трансформации, для этого были созданы соответствующие векторные конструкции pBract214-TPS1 и pBract214-TPS2 с помощью технологии Gateway-клонирования. В качестве эксплантов для трансформации использовали незрелые зародыши пшеницы. В экспериментах использовали штаммы A. tumefaciens GV3101, которые несли отдельно конструкции pBract214-TPS1 и pBract214-TPS2 с целевыми генами TPS1 и TPS2 соответственно, находящимися под контролем промотора убихитина кукурузы PUbi, и селективным маркерным геном гигромицин-фосфотрансферазы (hpt). Селекцию трансгенных растений осуществляли на питательных средах в присутствии гигромицина. Трансгенную природу полученых линий подтверждали с помощью ПЦР-метода с использованием специфических праймеров к генами TPS1 и TPS2.ru_RU
dc.description.abstractPlants of several common wheat varieties (Triticum aestivum L.) were established in in vitro culture, and their ability of plant regeneration was studied. In order to obtain plants with enhanced drought tolerance, varieties Myronivska 67 and Myrkhad were picked up for a further transfer of yeast (Saccharomyces cerevisiae) trehalose biosynthesis genes (TPS1 and TPS2) into their genomes. For this purpose, constructs pBract214-TPS1 and pBract214-TPS2 were created using the Gateway-cloning technique. Both constructs contained TPS1 and TPS2 genes under the control of the constitutive maize ubiquitin promoter (PUbi) and hygromycin-phosphotransferase (hpt) selectable marker gene. Transformation was carried out with the use of two A. tumefaciens strains GV3101 carrying the constructions pBract214-TPS1 and pBract214-TPS2. Wheat immature embryos were used as explants for the transformation. Selection of transgenic lines was carried out on nutrient medium supplemented with 30 mg/L hygromycin (as selective agent). The presence of yeast TPS1 and TPS2 sequences in genomic DNA isolated from transgenic wheat plants was confirmed by the PCR analysis using primers specific to these genes.en_US
dc.identifier.citationСтворення рослин пшениці з дріжджовими генами біосинтезу трегалози TPS1 i TPS2 / А. Ю. Кваско, С. В. Ісаєнков, К. В. Дмитрук, А. І. Ємець // Доповіді Національної академії наук України. - 2020. - № 6. - С. 92-100.uk_UA
dc.identifier.issn1025-6415
dc.identifier.urihttps://doi.org/10.15407/dopovidi2020.06.092
dc.identifier.urihttps://ekmair.ukma.edu.ua/handle/123456789/19399
dc.language.isoukuk_UA
dc.relation.sourceДоповіді Національної академії наук України.uk_UA
dc.statusfirst publisheduk_UA
dc.subjectтрегалозаuk_UA
dc.subjectдріжджові гениuk_UA
dc.subjectTPS1uk_UA
dc.subjectTPS2uk_UA
dc.subjectгенетична трансформаціяuk_UA
dc.subjectTriticum aestivumuk_UA
dc.subjectстаттяuk_UA
dc.subjectтрегалозаru_RU
dc.subjectдрожжевые геныru_RU
dc.subjectTPS1ru_RU
dc.subjectTPS2ru_RU
dc.subjectгенетическая трансформацияru_RU
dc.subjectTriticum aestivumru_RU
dc.subjecttrehaloseen_US
dc.subjectyeast genes of trehaloseen_US
dc.subjectTPS1en_US
dc.subjectTPS2en_US
dc.subjectgenetic transformationen_US
dc.subjectTriticum aestivumen_US
dc.titleСтворення рослин пшениці з дріжджовими генами біосинтезу трегалози TPS1 i TPS2uk_UA
dc.title.alternativeСоздание растений пшеницы с дрожжевыми генами биосинтеза трегалозы TPS1 и TPS2ru_RU
dc.title.alternativeThe Obtaining of Wheat Plants with Yeast Genes of Trehalose Biosynthesis TPS1 and TPS2en_US
dc.typeArticleuk_UA
Files
Original bundle
Now showing 1 - 1 of 1
Thumbnail Image
Name:
Stvorennia_roslyn_pshenytsi_z_drizhdzhovymy_henamy.pdf
Size:
349.82 KB
Format:
Adobe Portable Document Format
Description:
Download
License bundle
Now showing 1 - 1 of 1
No Thumbnail Available
Name:
license.txt
Size:
7.54 KB
Format:
Item-specific license agreed upon to submission
Description:
Download
Collections
Кафедра лабораторної діагностики біологічних систем